Адрес этой статьи в интернете: www.biophys.ru/archive/congress2012/proc-p52.htm
ОЦЕНКА ФУНГИЦИДНОЙ АКТИВНОСТИ ПРЕПАРАТОВ IN VITRO В СВЕРХСЛАБЫХ МАГНИТНЫХ ПОЛЯХ
Николаев А. И., Быстрова Е. Ю., Панина Л. К., Стефанов В.Е.
Санкт-Петербургский государственный университет
199034, Россия, Санкт-Петербург, Университетская наб., 7/9, E-mail: teterev3000@mail.ru
Ранее было показано, что сверхслабые магнитные поля предположительно имеют плеотропические механизмы действия на микроскопические грибы. Целью данной работы явилось исследование комбинированного воздействия экранированных сверхслабых магнитных полей (B ≈ 100 нТ) и антифунгальных препаратов, различающихся по клеточным мишеням их действия, на колонии микроскопических грибов. Были выбраны: (i) полиеновые антибиотики - амфотерицин В (АМФ-В) и нистатин, которые формируют комплексы с эргостеролом, нарушают плазматическую мембрану клеток грибов, что приводит к увеличению ее проницаемости, утечке ионов из цитоплазмы и к гибели грибной клетки; (ii) aзолы – клотримазол, итроконазол, флуконазол, ингибирующие у грибов фермент С14-ά-деметилазу системы цитохрома Р450, которая отвечает за конверсию ланостерола в эргостерол. Это ведет к истощению эргостерола в мембране грибной клетки и ее гибели.
В исследовании использовались грибы Ulocladium consortiale, Aspergillus sp., Trichoderma sp., Mucor sp., Penicillium sp. Использовали 2 альтернативных метода тестирования фунгицидов, во-первых, стандартный диск-диффузионный метод по Keurby-Bauer с оценкой величины зоны ингибирования роста грибов, при этом чашки Петри заражали спорами грибов сплошным газоном; и, во-вторых, оценивали скорость роста по приращению диаметра колонии при заражении в центр чашки Петри, на которой располагали по оси два диска, как и в первом варианте опытов. В обоих вариантах заражения грибы культивировали в условиях гипомагнитного поля (в экранирующей камере при B ≈ 100 нТ) и в земном поле при одинаковых условиях освещенности и температуры в контроле и опыте.
Результаты по диффузионному методу показали, что чувствительность грибов к антибиотикам как в контроле, так и в опыте уменьшается в ряду нистатин > итраконазол > АМФ-В > флуконазол > клотримазол, причем статистически достоверные различия в диаметрах зон ингибирования в гипомагнитных условиях и геомагнитном поле не обнаружены (см. например, рис.1). Однако, для метода посева в центр чашки для АМФ-В и нистатина обнаружены статистически достоверные различия между средними значениями скорости роста колонии по линии между дисками антибиотика выборок контроля и опыта (р=0,01474<0,05). Например, для дисков с АМФ-В удельная скорость роста U. consortiale составила μМПЗ = 3,345± 0,108 мм/сут, μГМП = 2,293± 0,308 мм/сут. (см. рис.2). Таким образом, результаты опытов продемонстрировали, что глубокое экранирование МПЗ влияет на скорость роста колоний (но не на конечный ее размер) в присутствии антибиотиков полиенового типа (АМФ- В и нистатин). Можно предположить, что мишенью магнитного поля могут выступать водородные связи, образующиеся при связывании антибиотиков-макролидов [1] с эргостеролом в клеточной мембране микромицетов, что приводит в синергическому эффекту.
|
|
|
|
Рис.1 Одинаковые зоны ингибирования роста микромицетов нистатином, при условиях культивирования: слева - гипомагнитное поле, справа - магнитное поле Земли. |
Рис.2 Различия в скорости роста колоний микромицетов в присутствии дисков с нистатином. слева - гипомагнитное поле, справа - магнитное поле Земли. |
EVALUATION OF THE EFFECTIVENESS OF FUNGICIDE AGENTS IN VITRO UNDER ULTRA-LOW MAGNETIC FIELDS
Nikolaev A. I., Bystrova E. Yu., Panina L. K., Stefanov V.E.
Saint-Petersburg State University, 199034, Russia, Saint-Petersburg, Univeritetskaya emb., 7/9,
E-mail: teterev3000@mail.ru
Литература:
[1].Gray, K. C., Palacios, D. S., Dailey, I., Endo, M. M., Uno, B. E., Wilcock, B. C., & Burke, M. D. //Proceedings of the National Academy of Sciences of the United States of America, 2012, т. 109, № 7, с. 2234-9.